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    發(fā)布時間:2021-10-04 22:14  

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    等溫核酸試劑盒

    重組酶聚合酶擴增技術(shù)(RPA)是2006年由英國科學(xué)家研發(fā)的一種核酸恒溫擴增技術(shù)。它是利用多種酶參與,在體外模擬生物體內(nèi)DNA復(fù)印,恒溫條件下短時間內(nèi)實現(xiàn)靶基因大量擴增,既可以擴增DNA,也可以擴增RNA。RPA技術(shù)具有恒溫、快速、便攜、靈敏度高、特異性強和操作簡單等優(yōu)點,是目前很有望替代PCR技術(shù)的核酸等溫擴增方法,在基層現(xiàn)場診斷中,具有廣闊的應(yīng)用前景。

    相對來說RPA是很好的恒溫擴增法,可在較低溫下恒溫擴增,不需要復(fù)雜儀器設(shè)備,操作簡單、反應(yīng)時間短,特異性好、靈敏度高,可采用電泳、熒光、側(cè)向流試紙等多種方式檢測擴增產(chǎn)物




    核酸試劑盒

    英國TwistDx 公司(前身為ASM科技有限公司)成立于1999年,基于英國劍橋Babraham研究院建立的生物技術(shù)公司。該公司通過突破等溫DNA擴增,開發(fā)的重組酶聚合酶擴增技術(shù)(RPA),被譽為DNA診斷領(lǐng)域的革命性創(chuàng)新。

    RPA技術(shù)主要依賴于三種酶:能結(jié)合單鏈核酸(寡核苷酸引物)的重組酶、單鏈 DNA結(jié)合蛋白(SSB)和鏈置換DNA聚合酶。這三種酶的混合物在常溫下也有活性,反應(yīng)溫度在37°C左右。



    側(cè)向流檢測試紙條作為一種能夠快速、方便、簡單、無需人員和大型儀器設(shè)備操作的 一種檢測核酸的POCT方法,已經(jīng)在臨床診斷,環(huán)境監(jiān)測和食品安全等領(lǐng)域得到了廣泛的應(yīng)用研究。

    為便于現(xiàn)場可視化檢測,本產(chǎn)品采用了FAM(FITC) -生物素報告基因進行層析檢測。陰性樣品中,金粒抗生物素與高濃度FAM(FITC) -生物素報告基因充分結(jié)合,結(jié)合物在對照Control條帶被抗FAM (FITC)攔截。對于陽性樣本,F(xiàn)AM(FITC) -生物素報告基因被裂解,金粒抗生物素的偶聯(lián)物生物素在檢測條帶積累,而在對照條帶積累減少。



    基本檢測原理是首先將待檢產(chǎn)物和兩種檢測物混合,特異性結(jié)合后形成帶有兩種標記(生物素和FITC)的復(fù)合物;隨后將該復(fù)合物滴加到試紙條的加樣區(qū),與加樣區(qū)的膠體金顆粒結(jié)合,新形成的復(fù)合物在層析膜擴散作用下擴散至檢測線,只有標記有生物素的復(fù)合物會被生物素配體捕獲,從而使檢測線“顯色”,而未結(jié)合檢測物的膠體金顆粒會繼續(xù)擴散至質(zhì)控線并捕獲進而使質(zhì)控線“顯色”。




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