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高效液相色譜

高效液相色譜與光譜技術聯用方法的研究也一直是色譜學科的研究熱點。20世紀80年代，可同時得到每個組分HPLC-UV三維譜圖的二極管陣列檢測器（DAD）問世，對紫外-可見光譜的快速掃描檢測，使液相色譜能提供的信息大幅度增加，為模式識別等化學計量學中的許多手段提供了重要的應用領域。90年代以后，HPLC-MS、HPLC-FTIR等色譜-光譜聯用技術逐漸成熟，為解決HPLC定性問題提供了多種實用、有效的手段。

為適應生命科學的發展，以制備色譜為主要對象的非線性色譜獲得了長足的發展，人們運用色譜法已能夠制備微量而貴重的生物活性化合物。而為了滿足天然產物分離制備、生物制藥等方面的需要，大規模的工業色譜技術、模擬移動床色譜技術得到發展，目前，日處理量達到千克級的液相色譜系統已經隨處可見。

高效液相色譜分析法和氣相色譜法的區別

氣相：氣相色譜是一種物理的分離方法。利用被測物質各組分在不同兩相間分配系數(溶解度)的微小差異，當兩相作相對運動時，這些物質在兩相間進行反復多次的分配使原來只有微小的性質差異產生很大的效果而使不同組分得到分離。

液相：高效液相色譜法是在經典色譜法的基礎上引用了氣相色譜的理論。在技術上，且流動相改為高壓輸送；色譜柱是以特殊的方法用小粒徑的填料填充而成，從而使柱效大大高于經典液相色譜(每米塔板數可達幾萬或幾十萬)；同時，柱后連有高靈敏度的檢測器可對流出物進行連續檢測。

應用范圍

氣相:

分離能力好、靈敏度高、分析速度快、操作方便等。

受技術條件的限制，沸點太高的物質或熱穩定性差的物質都難于應用氣相色譜法進行分析，一般對500℃以下不易揮發或受熱易分解的物質部分可采用衍生化法或裂解法。

液相:

高效液相色譜法只要求試樣能制成溶液，而不需要氣化，因此，不受試樣揮發性的限制。對于高沸點、熱穩定性差、相對分子量大(大于400以上)的有機物(些物質幾乎占有機物總數的75%~80%)原則上都可應用高效液相色譜法來進行分離、分析。據統計，在已知化合物中能用氣相色譜分析的約占20%而能用液相色譜分析的約占70~80%。