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發(fā)布時間：2020-09-07 06:50
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如何避免細胞抱團？1，用無鈣鎂平衡鹽溶液洗滌細胞。2，對于貼壁非常牢固的細胞（如MDCK），為了細胞更好的狀態(tài)，更漂亮的樣子，建議分多批多次消化，這樣才能大限度地將胰酶對細胞的損傷降到低，保證細胞的狀態(tài)能夠優(yōu)。3，消化過程中不要使勁搖動培養(yǎng)瓶，這樣細胞特別容易成屑樣脫落。細胞一旦脫落入懸液里就很難再將他吹打成單個（因為細胞沒有受力點了，所以細胞很難分散開）。所以必須要在細胞未脫落之前將其吹打開，嚴(yán)格控制好消化程度。
細胞抱團了，要如何處理？1，如果細胞抱團不影響生長就沒問題，只是計數(shù)的時候要麻煩點了。在消化的時候在細胞由多角形變成圓型之前，就用手輕磕培養(yǎng)瓶的側(cè)壁，使細胞從壁上脫落，就可以了！——不要吹打，對細胞性狀和生長都不好。2，如果感覺有死細胞的DNA，在細胞懸液中加入幾滴無菌的DNAse(1mg/ml溶于水)將DNA鏈打斷。輕柔地吹打細胞，防止對細胞膜造成物理損傷。
提高多肽穩(wěn)定性的途徑：（1）定點突變 ：通過基因工程手段替換引起多肽不穩(wěn)定的殘基或引入能增加多肽穩(wěn)定性的殘基，可提高多肽的穩(wěn)定性。（2）化學(xué)修飾：多肽的化學(xué)修飾方法很多，研究多的是PEG修飾。PEG是一種水溶性高分子化合物，在體內(nèi)可降解，無毒。PEG與多肽結(jié)合后能提高熱穩(wěn)定性，抵抗蛋白酶的降解，降低抗原性，延長體內(nèi)半衰期。選擇合適的修飾方法和控制修飾程度可體質(zhì)或提高原生物活性。
