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廣州碩譜生物科技有限公司，反相SPE柱，是目前國內生產SPE小柱較好的生產廠家。SPE小柱品牌

近幾年來，分析檢測技術取得了長足的進步，但樣品前處理仍是科研工作者面臨的挑戰。以下由小析姐與大家聊聊固相萃取小柱法開發中需要注意的問題。

固相萃取(Solid Phase Extraction，簡稱 SPE)是20世紀70年代中期發展起來的樣品前處理技術，其用途廣泛，并日益受到人們的歡迎。按其不同的吸附填料和吸附機理，主要分為正相、反相、離子交換和混合固相萃取小柱。正相、反相固相萃取小柱主要用于萃取極性和非極性化合物，而對某些帶電物質(離子化合物)的萃取回收率較低，例如C18固相萃取小柱，當目標化合物處于離子狀態時，C18對該化合物的能力因子顯著降低。

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正相態時，溶液體系的極性應按樣品溶劑、淋洗溶劑、洗脫溶劑的順序遞增，洗脫強度也隨之遞增。要確保所選的樣本溶劑不會洗脫目標物，所選的淋洗液應在不洗脫目標物的前提下，zui大限度地洗脫干擾物，這樣洗脫目標物才能碰巧完全洗脫目標物。鑒于大部分化合物都具有多種功能基團，在實際操作中，主要根據目標物和干擾物的性質考慮采用何種萃取機理。例如：2-萘胺為弱堿性化合物(pKa=4.16)，在一定 pH條件下可呈陽離子化狀態，同時又具有疏水和親水基。此時可根據樣品基質選擇有利于目標物與干擾物分離的萃取機理。

反相萃取分離主要是利用固相萃取材料官能團與目標化合物碳氫鍵之間的非極性作用力。反相非極性的 SPE柱通常更適合從極性基質中提取分離出非極性和中等極性的目標化合物。對利用非極性作用力吸附于非極性 SPE柱的目標化合物，可用氯i仿、環i己烷、乙i酸乙i酯等具有非極性的溶劑洗脫。當溶劑的洗脫強度足夠大，可以使目標化合物與吸附劑非極性基團間的范德華力不受影響時，使其在 SPE柱中順利洗脫。即使是極性更強的甲i醇，對許多化合物而言，也有足夠的非極性力量來洗脫它。有時候，單種溶劑無法完全洗脫疏水性的目標化合物，可以考慮使用二氯甲i烷：乙i酸乙i酯(1:1，體積比)。

對典型的硅膠基質鍵合反相柱體，在不使用緩沖液的情況下，建議采用下列清洗溶劑系列：甲i醇---乙晴---75%乙晴/25%異丙i醇---異丙i醇---二氯甲i烷---己烷；每種溶劑至少沖洗10個柱體，分析柱的洗滌流速為250 mm×4.6 mm。zui終以10柱體積異丙i醇過渡，然后返回到原始流動相(不含緩沖鹽)，zui后返回到初始流動相配置。如使用紫外檢測器，則應避免選擇在紫外區域有吸收作用的溶劑，否則需要使用大量的溶劑沖洗基線，以使基線穩定。四氫呋i喃也是常用的清潔溶劑。如懷疑柱子受到嚴重污染，也可用二甲亞砜(DMSO)或二甲i基胺與水按50:50的比例混合，用流速低于0.5 ml/min的水沖洗色譜柱。

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在實際工作中，人們經常希望 SPE柱可以多次使用以降低成本。美國瓦瑞安公司生產的 BOND ELUT CERTIFY SPE柱(J. Chromatogr.137:619;1993)的重復使用情況：當樣本基液為血漿時，該 SPE柱經再生后可重復使用2-3次(回收率可維持80%以上)。據報告，還可重復使用10次 SPE柱(J. Chromatogr.307:371;1986)。這種新型薄膜 SPE柱的再生相對比較容易，而且可以多次重復使用。

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有些人曾嘗試過15次以上重復使用這種類型的柱子。固相萃取柱的再利用主要依賴于樣品基液的復雜性。越復雜的基液，越不可能重復使用 SPE柱。要小心地重復使用 SPE柱。，使用過的 SPE柱子必須再生。更好的方法是用完后立即再生。二是要對再生后的 SPE柱進行評價，確保其本底可接受，回收率可接受。

固相萃取小柱 SPE工藝的基本步驟：

萃取柱的活性處理：選擇一種溶劑通過 SPE小柱潤濕和活化 SPE填料，使分析物能夠與固相表面緊密接觸，易于發生吸附作用，并可去除柱中可能存在的雜質，減少污染；隨后還要選擇一種易更換的溶劑，該溶劑具有急性毒性， PH值與樣品基體相似，可使樣品溶液與吸附劑表面良好接觸，提高粗去效率。