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    發(fā)布時(shí)間:2021-09-07 14:17  

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    為何在 SPE操作中會(huì)出現(xiàn)流速非常慢或流速不一致,回收率較低,且平行性差?也許很多小伙伴都遇到過這樣的問題。小子選錯(cuò)了,方法有問題嗎?或者填充材料的粒度分布不均勻,填充松緊度不穩(wěn)定?實(shí)際上 SPE小柱每批流速都有嚴(yán)格的質(zhì)量控制范圍,在質(zhì)量控制范圍內(nèi)的小柱可以保證穩(wěn)定的流速,超出質(zhì)量控制范圍的小柱將作為異常品處理。那么,是否可以采用一種穩(wěn)定的方法,用出廠流速測(cè)試合格

    實(shí)際上還有一個(gè)很容易被大家忽視的細(xì)節(jié)也會(huì)導(dǎo)致流動(dòng)速度過慢: SPE小柱在運(yùn)輸過程中篩板和填料可能會(huì)發(fā)生微小的松動(dòng),導(dǎo)致空氣進(jìn)入填料(一般不容易被肉眼看到),含氣填料在氣壓下會(huì)導(dǎo)致溶劑流動(dòng)緩慢。這一點(diǎn)大家都能理解,為什么同一批小柱子會(huì)出現(xiàn)流速不平衡的情況

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    正壓除氣泡

    試樣數(shù)量較少,填充量較小,人工施加正壓較為方便,可采用針筒連接接頭法進(jìn)行正壓排除氣泡。

    □負(fù)壓排泡

    試樣量較大,填料量大,人工施加正壓不便,可用真空泵連接固相萃取裝置,負(fù)壓排出氣泡。

    1.2排氣泡的時(shí)間?

    在 SPE操作中,一般包括平衡活化、上樣、淋洗、洗脫四步。是否每個(gè)步驟都需要一個(gè)排氣泡?但是,一般情況下,當(dāng)填料之間有空隙時(shí),需要排出氣泡,例如,當(dāng)平衡液被激1活后,需要排出氣泡,使溶液能更好地與填料接觸。

    另外還有一個(gè)容易忽略的環(huán)節(jié)也是需要排出氣泡的,一般淋洗后需要進(jìn)行抽干操作,抽干后填料間也會(huì)有空氣進(jìn)入,加入洗脫液后,也是要排出氣泡的,否則大量的氣泡也會(huì)嚴(yán)重影響洗脫液的流速和洗脫效果。



    在反相-固相萃取模式中,溶劑體系的極性應(yīng)按樣品溶劑、淋洗溶劑、洗脫溶劑的順序遞減,而溶劑體系的洗脫強(qiáng)度應(yīng)逐漸增加。要確保所選的樣本溶劑不會(huì)洗脫目標(biāo)化合物,所選的淋洗劑應(yīng)在不洗脫目標(biāo)化合物的前提下,很大限度地洗脫干擾物,所選的洗脫劑應(yīng)能恰巧完全洗脫目標(biāo)化合物。

    作用機(jī)理:在許多固相萃取材料的極性表面和樣品中目標(biāo)化合物的極性官能團(tuán)之間會(huì)產(chǎn)生極性作用力。普通吸附劑極性力作用在色譜中通常稱為正相色譜吸附劑。極性力比非極性力更強(qiáng),但比離子力更弱。常用的極性基團(tuán)有羥基,胺基,巰基等。由于非極性溶劑不能與極性固定相材料形成具有氫鍵的官能團(tuán),因此非極性基質(zhì)環(huán)境對(duì)吸附劑和目標(biāo)化合物之間的極性作用力是有利的。結(jié)果表明,在極性作用下,樣品的固相萃取過程中,基質(zhì)主要是非極性的,如正己烷、二氯甲1烷、菜油等,而目標(biāo)化合物中多含有極性大的官能團(tuán)。

    含碳量

    碳量是指填料的含碳量,從側(cè)面反映了C18的修飾程度,在分離效果和目標(biāo)成分保持時(shí)間方面起著重要作用。對(duì)于相同類型的填料,高碳柱上的非極性化合物比高碳柱上的碳含量高,碳鏈增大,同時(shí)也增加了結(jié)合相的非極性作用面積。C18碳含量由不同的鍵合工藝決定,市場(chǎng)上C18碳含量一般在17-22%之間,也有一些特殊C18碳含量超過22%,但低于14%的C18填料。大部分樣本可以用普通碳含量的C18來解決。而C18的含碳量也并非越多越好,根據(jù)樣品性質(zhì)和純化需要選擇不同含碳量的C18,例如,極性較大的化合物在高含碳量的C18中的保留程度不如低含碳量的C18。



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    固相抽提作用:濃縮:

    在微量分析或制備過程中,富集目標(biāo)物是必要的。例如,分析水中 PAHs時(shí),可將1000毫升水樣加入 SPE柱, PAHs留在柱中,然后用少量溶劑(如2毫升)洗脫,使 PAHs得到500倍濃縮,這意味著,在相同的檢測(cè)條件下,對(duì)分析物的檢測(cè)限度只有處理前的1/500。

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    純化:儀器分析前先去除雜質(zhì),這樣既避免了雜質(zhì)對(duì)目標(biāo)物的干擾,提高了分析的靈敏度,又避免了雜質(zhì)對(duì)儀器造成的損害。

    變換溶劑:某些分析儀對(duì)分析物溶解溶劑有特殊要求,可采用 SPE柱變換。例如,用 GC法分析半揮發(fā)性污染物時(shí),如果直接采用進(jìn)樣法,水分將影響分離效果,損害氣相色譜柱,因此需要將溶劑轉(zhuǎn)換為溶劑。水樣品加入反相萃取柱后,目標(biāo)物在柱中與水分離,然后用對(duì)目標(biāo)物溶解性強(qiáng)且揮發(fā)性好的洗脫,干燥和濃縮后進(jìn)行分析。




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