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反相分離柱C18的適用范圍

C18反相分離柱廣泛應用于天然產物的提取，藥1物合成研究與開發，生物制藥等領域。若樣品極性偏大， Rf值非常接近，則不能分離正相模式；終產物要求純度98%以上，采用正相模式達不到；樣品在正相條件下存在溶解問題——不妨考慮采用反相C18模式分離。由于其填料粘合技術的成熟和良好的分離能力，C18柱已成為日常接觸分離提純研究人員zui多的反相柱。

反相式C18反相分離柱的主要參數

分離柱C18有多種參數，大致可分為四個方面：相鍵(包括修飾、封端)、填充載體(硅膠純度、填充顆粒類型、粒徑、孔徑)、柱體本身(柱效、柱內徑、柱長)和隱藏參數(比表面積、碳含量等)。小編想選擇以下幾個大家容易忽略的

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反向作用機制：

反相萃取分離主要是利用固相萃取材料官能團與目標化合物碳氫鍵之間的非極性作用力。反相非極性的 SPE柱通常更適合從極性基質中提取分離出非極性和中等極性的目標化合物。

對利用非極性作用力吸附于非極性 SPE柱的目標化合物，可用氯1仿、環己1烷、乙1酸乙1酯等具有非極性的溶劑洗脫。當溶劑的洗脫強度足夠大，可以使目標化合物與吸附劑非極性基團間的范德華力不受影響時，使其在 SPE柱中順利洗脫。即使是極性更強的甲1醇，對許多化合物而言，也有足夠的非極性力量來洗脫它。有時候，單種溶劑無法完全洗脫疏水性的目標化合物，可以考慮使用二氯甲1烷：乙1酸乙1酯(1:1，體積比)。

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原則：用 SEP柱不同填料中測定的化合物與背景雜質的分配系數差異，匹配相應的洗脫溶劑，將化合物與雜質分離。

分類：反相萃取柱(從極性基質中提取非極性樣品)，正相萃取柱(從極性基質中提取極性樣品)，離子交換萃取柱(從電荷樣品中提取)。

應用：它主要用于反相萃取，適用于非極性到中極性化合物，如素、、酞嗪、、、染料、芳香香油、脂溶性維生素、殺真菌劑、除草劑、環境、 PAH和 PCB殘留物、食品添加劑、碳水化合物、對羥基甲取代脂、酚類、酚類、鄰苯二甲酸酯、類固醇、表活化劑、、水溶性維生素等。

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Phenyl苯柱：與C18和C8相比，吸附較弱，適用于非極性化合物到中極性化合物，特別是苯系化合物。Cyano-cn氰基柱

反相萃取：適于中極性化合物，正相萃取：適于，物質，染料，除草劑，，類固醇；弱陽離子交換萃取：適于碳水化合物，陽離子化合物…

氨基阿米諾-NH2：正相抽提：適用于極性化合物，弱陰離子交換抽提：適用于碳水化合物，弱陰離子及有機酸化合物。

AluminaA型酸性氧化鋁柱，

當選用柱狀規格時，必須考慮到目標化合物和在萃取條件下可能吸附的總干擾物，而不僅僅是目標化合物。另外，即使目標化合物未超過柱容量， SPE柱在保留目標化合物的同時也保留了部分干擾物，由于兩者的總量已超過柱容量，其結果必然是部分目標化合物無法保留在 SPE柱中。

預處理溶劑和參數的選?。?

確定預處理 SPE柱所用溶劑及其用量和流速，并進行平衡。在反相或離子交換柱中，通常以或極性為預處理溶液，以水或緩沖溶液為平衡溶液。

樣本過柱流速度的選擇：下一步是確定樣品通過 SPE柱流動速度。過柱流速與 SPE試樣中填充物的粒徑分布、填充物的填充密度、目標化合物與試樣基質的結合程度、試樣的粘度等因素有關。