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發(fā)布時(shí)間：2017-03-07 19:08
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相信一些童鞋在拿到cck-8檢測(cè)試劑盒做cck-8細(xì)胞增殖檢測(cè)實(shí)驗(yàn)，都會(huì)碰到一些實(shí)驗(yàn)的問題，比如是1.在96 孔板中細(xì)胞鋪板總是不均勻 ，聚堆怎樣才能解決呢？2.在做加藥實(shí)驗(yàn)時(shí)，藥物對(duì)測(cè)定是否有影響？如何解決？3.在實(shí)驗(yàn)中吸光度值太高，如果不能減少細(xì)胞數(shù)量，如何解決？下面我們就為大家一一解答。
在做加藥實(shí)驗(yàn)時(shí)，藥物對(duì)測(cè)定有時(shí)會(huì)有影響。如果藥物具有還原性，會(huì)和CCK8發(fā)生顯色反應(yīng)，增加吸光度。解決辦法：首先要確認(rèn)藥物是否有吸收，在含有藥物的培養(yǎng)基中加入CCK8，測(cè)定450 nm的吸光度，如果它的吸光度比不含藥物的培養(yǎng)基 (加CCK8)的吸光度高，則證明藥物有影響，可在加CCK8之前更換培養(yǎng)基，去掉藥物的影響。
在實(shí)驗(yàn)中吸光度值太高，如果不能減少細(xì)胞數(shù)量，可以縮短加入CCK8后的培養(yǎng)時(shí)間。例如：可以把加入CCK8試劑后的培養(yǎng)時(shí)間由2小時(shí)縮短為1小時(shí)。
CCK-8檢測(cè)試劑盒作為為何是好的選擇對(duì)細(xì)胞增殖和毒性檢測(cè)
· 如下表，CCK-8法與其他細(xì)胞增殖/毒性檢測(cè)方法的優(yōu)勢(shì)比較，結(jié)果不言而喻！
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檢測(cè)方法 |
MTT法 |
XTT法 |
WST-1法 |
CCK-8法 |
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甲臜產(chǎn)物的水溶性 |
差（需加有機(jī)溶劑溶解后再檢測(cè)） |
好 |
好 |
好 |
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產(chǎn)品性狀 |
粉末 |
2瓶溶液 |
溶液 |
1瓶溶液 |
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使用方法 |
配成溶液后使用 |
現(xiàn)配現(xiàn)用 |
即開即用 |
即開即用 |
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檢測(cè)靈敏度 |
高 |
很高 |
很高 |
高 |
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檢測(cè)時(shí)間 |
較長 |
較短 |
較短 |
最短 |
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檢測(cè)波長 |
560-600nm |
420-480nm |
420-480nm |
430-490nm |
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細(xì)胞毒性 |
高，細(xì)胞形態(tài)完全消失 |
很低，細(xì)胞形態(tài)不變 |
很低，細(xì)胞形態(tài)不變 |
很低，細(xì)胞形態(tài)不變 |
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試劑穩(wěn)定性 |
一般 |
較差 |
一般 |
很好 |
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批量樣品檢測(cè) |
可以 |
非常適合 |
非常適合 |
非常適合 |
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便捷程度 |
一般 |
便捷 |
便捷 |
非常便捷 |
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* 細(xì)胞毒性非常低，因此加入WST-8顯色后，可以在不同時(shí)間反復(fù)用酶標(biāo)儀讀數(shù)從而找到最佳測(cè)定時(shí)間
* 酚紅和血清對(duì)CCK法的檢測(cè)不會(huì)造成干擾（扣除空白孔即可）
如何選擇合適的CCK-8檢測(cè)試劑盒？
目前市面上能提供的【CCK-8】細(xì)胞增殖／毒性檢測(cè)試劑盒有國產(chǎn)分裝或原產(chǎn)的，國產(chǎn)分裝的CCK-8試劑盒在質(zhì)量穩(wěn)定性上有不足。而原產(chǎn)于國內(nèi)實(shí)驗(yàn)室的CCK-8試劑盒有些具有較好的檢測(cè)結(jié)果，在批次之間的穩(wěn)定性上較難控制。至于原裝進(jìn)口供應(yīng)CCK-8試劑盒的進(jìn)口品牌并不多，就連Abcam、Thermo，Sigma等等幾個(gè)品牌都不能夠提供CCK-8試劑盒，而其它品牌在性價(jià)比上遠(yuǎn)遜于Abbkine產(chǎn)品。
