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發布時間：2021-09-05 06:44
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低溫生物菌種——制備
也稱種子制備，是指菌種在一定條件下，經過擴大培養成為具有一定數量和質量的純生產菌種的制備過程。以作接入發酵罐中進一步擴大菌體量及合成產物之用。種子制備包括孢子制備和菌絲體制備（見圖），其中(1)～(4)為孢子制備過程。保存在沙土管或冷凍管中的生產菌種，用無菌手續挑取少許，接入瓊脂斜面培養基上，在25℃（或較高溫度）下培養5～7天(或較長時間)。所得孢子還需進一步用較大表面積的固體培養基以獲得更多孢子，對于霉菌類孢子制備，多數采用大米、小米之類的天然培養基。將培養成熟的斜面孢子制成懸浮液，接種到扁瓶固體培養基上，于25～28℃培養14天。將成熟的扁瓶孢子于真空中抽干，使水分降至10%以下，并放入 4℃冰箱中備用。一次制得的孢子瓶可在生產上延續使用半年左右。菌孢子的培養基大多是采用麩皮或豌豆浸出液、牛肉膏及無機鹽與瓊脂制成的。將斜面孢子接入擴大的扁瓶孢子培養基中,于28～37℃培養5～14天。所獲得的大量孢子可直接作為種子罐 (6)的種子。如果有些生產菌種不產孢子，如產生菌或產孢子不多的,則可采用搖瓶（5）液體培養制得菌絲體，作種子罐的種子。種子罐的目的是使接入有限的孢子或菌絲體迅速發芽、生長、繁殖成大量菌體。其中的培養基組分應是易于被菌體利用的碳源（如葡萄糖）和氮源（如玉米漿等）,及無機鹽(如磷酸鹽)等。作為發酵罐(7)的種子應是生命力旺盛、染色深、菌絲粗壯,無雜菌及異常菌體。接種量一般在10%～20%。
低溫生物菌種的保存方法
低溫保存法
①簡單保存法，將瓊脂斜面孢子培養物、菌絲懸浮液以及由麩皮、大米、小米等谷物原料制成的孢子培養物置于4℃冰箱保存,保存時間不超過1～2個月，若將谷物原料制備的孢子瓶抽真空并在棉塞上浸蠟,以隔絕外界空氣和水汽,保持時間可達3～4個月；
②液氮超低溫保存法，將生長穩定期的細胞懸浮在10%甘油或其他低冰點液體中，密封于安瓿管內，然后控制冷卻速度，使安瓿管溫度逐步下降至 -35℃時，即可置于-150～-196℃的液氮罐中保存。大多數微生物如病毒、噬菌體、多種細菌、酵母和原蟲、特別是一些用冷凍干燥法有困難的微生物，都可用此法長期保存。
低溫生物菌種的應用前景及發展趨勢
微生物在農業上的作用已逐漸被人們所認識。國際上已有70多個國家生產、應用和推廣微生物肥料。我國也有250家企業年產約數十萬噸微生物肥料應用于生產。這雖與同期化肥產量和用量不能相比，但確已開始在農業生產中發揮作用，取得了一定的經濟效益和社會效應，隨著相關研究的深入和市場需求的不斷擴大，微生物肥料生產已呈現出規模化工業生產模式。
生物菌種概述
生物菌種是有機固體廢物（包括有機垃圾、秸稈、畜禽糞便、餅粕、農副產品和食品加工產生的固體廢物）經生物肥菌種發酵、除臭和完全腐熟后加工而成的有機肥料。能夠調理土壤、激發土壤中微生物活躍率、克服土壤板結、增加土壤空氣通透性。提高土壤肥力，使糧食作物、經濟作物、蔬菜類、瓜果類大幅度增產。
注意：
①視水分多少增減配比，發酵混合物的總水分應控制在60～65%。過高過低均不利于發酵，水過少，發酵慢；水過多會導致通氣差、升溫慢并產生臭味。水分合適與否判斷辦法：手緊抓一把物料，指縫見水印但不滴水，落地即散。
②如果按每噸添加1公斤尿素或10公斤過磷酸鈣發酵效果。
