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    發(fā)布時間:2020-07-30 14:59  

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        如何提取胎牛血清白蛋白的!

    一、所需材料,胎牛血清取近郊屠宰場,以檸檬酸三鈉為抗凝劑,血液采集后隨即分離出血漿備用。需要的試劑有血清白蛋白;xiu jia酚氯;醋酸纖維素薄膜,其余試劑均為分析純。提取胎牛血清白蛋白需要準備 LG-6型大容量冷凍離心機,DF-C型電泳儀,UV-754型紫外可見分光光度計,PHS-2型酸度計。

    二、具體方法,白蛋白含量測定 采用xiu jia酚氯法,以胎牛血清白蛋白為標準. 白蛋白純度的測定 采用醋酸纖維素薄膜電泳法。吸光度值的測定 用分光光度計直接測定蛋白質(zhì)溶液在波長為403 nm處的光吸收值,然后折算成濃度為10 g/L時牛血清白蛋白的光吸收值,用A403表示。




        關于抗體的選擇

        種屬特異性:同 種蛋白不同物種,有著或大或小的差異。目前大部分商品化抗體都是以人源蛋白序列為模板重組蛋白或設計多肽抗原的,根據(jù)蛋白的同源性的情況與其他種屬發(fā)生交叉 反應。需要參照說明書注明的可反應種屬信息。一些稀有種屬很難找到抗體,可以通過蛋白的序列比對,選擇同源序列免yi 的抗體,不過一般這種情況生產(chǎn)商不會受 理其關于質(zhì)量的申訴,如果可以申請到免費的抗體樣品,則利于抗體選擇。



    細胞培養(yǎng)小妙招

    1、勤換水,水浴鍋很臟,細胞培養(yǎng)箱要是得手動加濕的話,盤里的水也會很臟。那種公用的水浴鍋、培養(yǎng)箱,定期換水習慣不好的,交叉污染嚴重的,那就可以選擇一些綠色、安全、無刺激性的chu菌劑,改善一下,免得細胞遇到污染時措手不及。

    2、勤擦洗,培養(yǎng)箱隔一段時間徹底用安全出菌劑擦洗一次,有人用酒精擦洗,但畢竟究竟只能除掉細菌,對于真菌是沒有辦法sha死的,所以這里推薦大家選用效果和口碑都不錯的chu菌劑處理。

    3、勤清潔,細胞房日常的值日清潔是必須的,此外還要定期熏蒸。


       如何避免血清中沉淀物的出現(xiàn)?

       首先要注意正確的血清解凍步驟,而且溶解過程中一定要每隔一段時間均勻而緩慢的搖動血清。我們已經(jīng)發(fā)現(xiàn)在下列情況下沉淀物可能增加,使用中應該盡量避免:(1)熱滅huo血清;(2)在 37℃下培養(yǎng)血清;(3)反復凍融;(4)γ射線照射;(5)長期儲存在 2-8℃;(6)在室溫下放置時間過長。

        如何去除血清中的沉淀?

        如想去除這些絮狀沉淀物,可以將血清分裝到無菌離心管中,以 400g 離心,上清液即可直接加入到培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾。注意:不要以過濾的方式去除這些絮狀沉淀物,因為這可能阻塞濾膜。




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