單分散層析介質優惠報價「納微科技」

小粒徑無孔單分散層析介質用于病毒的分離純化

傳統的層析介質填料都是多孔的微球，因為多孔微球材料的比表面積大，因而可以對一般生物分子分離提供較高的吸附載量。層析介質的孔徑一般都小于2000?（通常都小于100納米）。而很多病毒顆粒的粒徑一般都大于20納米，有的甚至都超過100納米。由于體積排阻的原因，病毒顆粒無法擴散進入層析介質的孔內，因而在層析吸附病毒顆粒時只有介質微球的外表面可以利用，孔內表面積由于體積排阻的原因而無法吸附病毒顆粒。然而，病毒樣品中的雜質分子一般都比病毒小，因而可以擴散進入層析介質孔內被吸附在里面。由于傳統層析介質孔內表面積遠遠大于介質微球外表面積，雜質吸附往往由于孔內表面積的存在而非常顯著，吸附洗脫時雜質含量因而較高，病毒顆粒純化效果往往不理想。無孔層析介質由于沒有大量只能容納雜質進入而病毒顆粒無法擴散進入的內孔，病毒顆粒在介質外表面的層析吸附量雖然不會有明顯變化，但樣品中的雜質被層析吸附的量會顯著減少。因此經無孔層析填料層析洗脫后，病毒樣品的分離純度顯著提高。

分離純化抗l體的目的。野l生型Protein A蛋白是金黃色葡l萄球菌細胞壁錨釘蛋白。三維空間上，抗l體FC端CH2-CH3區域與Protein A蛋白B結構域上兩條反相平行的α螺旋結構相互結合。因此Protein A與抗l體分子特別是與IgG1、IgG2、IgG4有特異性結合，使得抗l體分子與發酵液中不具FC端結構的雜質如宿主蛋白與核酸等有效分離，進而達到純化目的。Protein A 親和層析介質是通過把ProteinA 配基偶聯到微球介質上制備而成的。因為Protein A配基與目標抗l體的作用的專一性，因此親和層析的分離純化工藝和方法與抗l體樣品雜質含量和種類多少影響不大，使用Protein A 介質一步純化目標抗l體就可以達到95%以上純度，回收率達到90%以上。親和純化效率也基本不受雜質多少影響，而其它分離模式如離子交換，疏水，分子篩等的分離工藝方法及效率大多取決于與目的蛋白同時存在的雜質種類和含量。因此，只要樣品雜質不同，即使是純化同樣的目標生物分子，采用的分離工藝和方法就不同。以重組胰島素分離純化為例，不同廠家雖然生產的是同一目標胰島素，但采用分離純化方法完全不一樣，主要原因就是每家生產的胰島素雜質組成和含量不一樣，因此需要不同的純化工藝。而比胰島素分子量更大，結構更復雜的抗l體基本可以采用標準化的三步曲，主要原因就是Protein A 親和介質的出現大大簡化抗l體的分離純化工藝，但Protein A 價格昂貴讓抗l體生產廠家愛恨交加。

   之三：高度交聯聚丙l烯酸酯基球替代軟膠或低交聯的聚丙l烯酸酯基球    高機械強度介質不僅可以耐受更高流速、更高壓力、更大粘度樣品，還可以裝更高的柱床，以增加抗l體批處理量、提高抗l體生產效率、減少設備投資、減少廠房占用面積。因此納微Protein A 介質是選擇高度交聯的聚丙l烯酸酯基球，與市場上以瓊脂糖或低交聯度聚丙l烯l酸酯為基球生產的Protein A 介質相比具有溶脹系數小、壓縮比例低、而且機械性能強。實驗證明 UniMab在2公斤裝柱壓力下，其柱床壓縮比例只有5%，而無論是GE 生產的以瓊脂糖為基球還是Tosoh 生產的低交聯聚合物為基球的Protein A 介質壓縮比例往往超過15%。