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    連續流層析品牌企業 蘇州納微科技

    發布時間:2021-08-01 21:20  

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    病毒相對于宏觀世界物質甚至與細菌相比都是極其微小的生物體,但與傳統蛋白及核酸生物分子相比,其尺寸又大很多,結構也復雜得多。病毒結構通常由蛋白質組成外衣殼,由核酸組成內芯,因此比蛋白和核酸分子都要復雜很多。病毒尺寸一般在20-100納米之間,而細菌尺寸一般在1000納米以上,蛋白分子尺寸往往在10納米以下。人們只能借助電子顯微鏡才能看到病毒的結構和形貌。雖然多肽,蛋白,核酸等生物大分子都有成熟的分離純化方法,但病毒到目前也沒有一個比較理想的分離方法。





    層析介質粒徑大小及均勻性對生物分離的影響



    層析介質粒徑大小和分布是影響其分離性能很重要的參數之一。粒徑越小,分布越均勻,柱效越高,分辨率越高。因此制備精l確的粒徑大小及高度的粒徑均一性的單分散層析介質一直是業界追求的目標。納微成功開發出單分散大孔聚合物層析介質可以用于分離生物大分子。納微單分散層析介質的研發成功不僅填補國內這一領域的空白,也為世界單分散層析介質的發展做出貢獻。




    小粒徑無孔單分散層析介質用于病毒的分離純化

    傳統的層析介質填料都是多孔的微球,因為多孔微球材料的比表面積大,因而可以對一般生物分子分離提供較高的吸附載量。層析介質的孔徑一般都小于2000?(通常都小于100納米)。而很多病毒顆粒的粒徑一般都大于20納米,有的甚至都超過100納米。由于體積排阻的原因,病毒顆粒無法擴散進入層析介質的孔內,因而在層析吸附病毒顆粒時只有介質微球的外表面可以利用,孔內表面積由于體積排阻的原因而無法吸附病毒顆粒。然而,病毒樣品中的雜質分子一般都比病毒小,因而可以擴散進入層析介質孔內被吸附在里面。由于傳統層析介質孔內表面積遠遠大于介質微球外表面積,雜質吸附往往由于孔內表面積的存在而非常顯著,吸附洗脫時雜質含量因而較高,病毒顆粒純化效果往往不理想。無孔層析介質由于沒有大量只能容納雜質進入而病毒顆粒無法擴散進入的內孔,病毒顆粒在介質外表面的層析吸附量雖然不會有明顯變化,但樣品中的雜質被層析吸附的量會顯著減少。因此經無孔層析填料層析洗脫后,病毒樣品的分離純度顯著提高。


    Protein A 介質價格高的主要原因是其生產工藝復雜,ProteinA 配基是通過生物發酵生產的,經過純化后偶聯到介質上成為Protein A 親和介質,因此生產成本遠高于傳統的離子交換、疏水、分子篩等介質。另一方面Protein A產品主要由歐美幾家供應商壟斷,也是價格居高不下的原因之一。為了降低抗l體生產成本,不少研究工作者在尋找可以取代Protein A且價格低廉的新型層析介質來純化抗l體,雖然可能在一些個案中獲得成功,但都無法撼動Protein A 在整個抗l體分離純化的壟斷地位。ProteinA 親和層析成為過去近30年里抗l體純化捕獲的金標準。因此要降低抗l體親和層析這一步的成本首要的方案是實現Protein A 介質的國產化以降低產品價格;其次是通過采用的連續層析工藝技術或其它新工藝以提高Protein A 介質的利用率并提高抗l體生產效率。當然不斷改進Protein A 介質性能使其具有更高的載量和更長的使用壽命也可以降低抗l體的生產成本。



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