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發(fā)布時(shí)間：2020-07-30 14:59
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如何提取胎牛血清白蛋白的！
一、所需材料，胎牛血清取近郊屠宰場(chǎng)，以檸檬酸三鈉為抗凝劑，血液采集后隨即分離出血漿備用。需要的試劑有血清白蛋白；xiu jia酚氯；醋酸纖維素薄膜，其余試劑均為分析純。提取胎牛血清白蛋白需要準(zhǔn)備 LG-6型大容量冷凍離心機(jī)，DF-C型電泳儀，UV-754型紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)，PHS-2型酸度計(jì)。
二、具體方法，白蛋白含量測(cè)定 采用xiu jia酚氯法，以胎牛血清白蛋白為標(biāo)準(zhǔn). 白蛋白純度的測(cè)定 采用醋酸纖維素薄膜電泳法。吸光度值的測(cè)定 用分光光度計(jì)直接測(cè)定蛋白質(zhì)溶液在波長(zhǎng)為403 nm處的光吸收值，然后折算成濃度為10 g/L時(shí)牛血清白蛋白的光吸收值，用A403表示。
關(guān)于抗體的選擇
種屬特異性：同 種蛋白不同物種，有著或大或小的差異。目前大部分商品化抗體都是以人源蛋白序列為模板重組蛋白或設(shè)計(jì)多肽抗原的，根據(jù)蛋白的同源性的情況與其他種屬發(fā)生交叉 反應(yīng)。需要參照說(shuō)明書(shū)注明的可反應(yīng)種屬信息。一些稀有種屬很難找到抗體，可以通過(guò)蛋白的序列比對(duì)，選擇同源序列免yi 的抗體，不過(guò)一般這種情況生產(chǎn)商不會(huì)受 理其關(guān)于質(zhì)量的申訴，如果可以申請(qǐng)到免費(fèi)的抗體樣品，則利于抗體選擇。
細(xì)胞培養(yǎng)小妙招
1、勤換水，水浴鍋很臟，細(xì)胞培養(yǎng)箱要是得手動(dòng)加濕的話，盤(pán)里的水也會(huì)很臟。那種公用的水浴鍋、培養(yǎng)箱，定期換水習(xí)慣不好的，交叉污染嚴(yán)重的，那就可以選擇一些綠色、安全、無(wú)刺激性的chu菌劑，改善一下，免得細(xì)胞遇到污染時(shí)措手不及。
2、勤擦洗，培養(yǎng)箱隔一段時(shí)間徹底用安全出菌劑擦洗一次，有人用酒精擦洗，但畢竟究竟只能除掉細(xì)菌，對(duì)于真菌是沒(méi)有辦法sha死的，所以這里推薦大家選用效果和口碑都不錯(cuò)的chu菌劑處理。
3、勤清潔，細(xì)胞房日常的值日清潔是必須的，此外還要定期熏蒸。
如何避免血清中沉淀物的出現(xiàn)？
首先要注意正確的血清解凍步驟，而且溶解過(guò)程中一定要每隔一段時(shí)間均勻而緩慢的搖動(dòng)血清。我們已經(jīng)發(fā)現(xiàn)在下列情況下沉淀物可能增加，使用中應(yīng)該盡量避免：（1）熱滅huo血清；（2）在 37℃下培養(yǎng)血清；（3）反復(fù)凍融；（4）γ射線照射；（5）長(zhǎng)期儲(chǔ)存在 2-8℃；（6）在室溫下放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng)。
如何去除血清中的沉淀？
如想去除這些絮狀沉淀物，可以將血清分裝到無(wú)菌離心管中，以 400g 離心，上清液即可直接加入到培養(yǎng)基內(nèi)一起過(guò)濾。注意：不要以過(guò)濾的方式去除這些絮狀沉淀物，因?yàn)檫@可能阻塞濾膜。
