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等溫核酸試劑盒

據介紹，RPA檢測的靈敏度很高，能夠將痕量的核酸(尤其是DNA)模板擴增到可以檢出的水平，從單個模板分子得到大約1012擴增產物。而且RPA還用不著復雜的樣品處理，適用于無法提取核酸的實地檢測。RPA不僅可以對擴增產物進行終點檢測，還可以對擴增過程進行實時監控，甚至可以通過試紙條(側流層析試紙條LFD)讀取結果。

目前，TwistAmp? 試劑盒的擴增子長度在500bp以內。不過，經過特別優化的RPA擴增，也可以生成更長的擴增產物，或者減慢擴增速度(便于定量)，甚至在更低的溫度下進行反應。

FAQ

1 RPA能實現多重化嗎?

可以。RPA技術支持在同一個管中同時進行多個擴增反應。不過，多重化的引物組合需要精心設計，以便每個引物都能同樣有效的工作。需要注意的是，RPA反應的引物總量(nmol)不要超標太多。如果在一個反應中使用兩個以上的擴增引物，就應該控制不同引物的量。另外，我們應當事先考慮好檢測多個擴增事件的探針、設備以及熒光團的兼容性。

能否對模板進行定量?

可以。擴增子達到可檢出水平的時間，依賴于反應起始時的模板量。初始模板的拷貝越多，擴增子就越快達到可檢出水平。不過，這種定量需要精心的實驗安排，確保對照反應是同時開始的。舉例來說，可以利用鎂離子的添加時間進行控制。因為鎂離子一旦進入體系，RPA反應就會開始。

此外，較慢的擴增過程有助于的定量。我們可以通過調整反應條件或引物設計來減慢RPA的反應速度。

試劑盒

英國TwistDx Inc公司開發的重組酶聚合酶擴增(Recombinase Polymerase Amplification，RPA)--被稱為是可以替代PCR的核酸檢測技術，目前新的等溫擴增檢測技術。以此為基礎的TwistAmp? 核酸擴增產品，能夠在15分鐘內進行常溫下的單分子核酸檢測。該技術對硬件設備的要求很低，特別適合用于體外診斷、獸醫、食品安全、生物防御和農業等領域。常規PCR必須經過變性、退火、延伸三個步驟，而PCR儀本質上就是一個控制溫度升降的設備。RPA反應的適宜溫度在37°C - 42°C之間，無需變性，在常溫下即可進行。這無疑能大大加快PCR的速度。此外，由于不需要溫控設備，RPA可以真正實現便攜式的快速核酸檢測。據介紹，RPA檢測的靈敏度很高，能夠將痕量的核酸(尤其是DNA)模板擴增到可以檢出的水平，從單個模板分子得到大約1012擴增產物。而且RPA還用不著復雜的樣品處理，適用于無法提取核酸的實地檢測。RPA不僅可以對擴增產物進行終點檢測，還可以對擴增過程進行實時監控，甚至可以通過試紙條(側流層析試紙條LFD)讀取結果。