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發布時間：2021-10-17 06:05
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蛋白質結晶方法
結晶方法(Crystallization Techniques)1.1.1 分批結晶(Batch Crystallization) 這是老的簡單的結晶方法，其原理是同步地在蛋白質溶液中加入沉淀劑，立即使溶液達到一個高過飽和狀態。幸運的話，不需進一步處理即可在過飽和溶液中逐漸長出晶體。一個用于微分批結晶的自動化系統已被Chayen等人設計出（1991，1992），其微分批方法中，他們在1-2μl包含蛋白質和沉淀劑的液滴中生長晶體。液滴被懸浮在油（如石蠟）中，油的作用是作為封層以防止蒸發，它并不干擾普通沉淀劑，但是干擾能溶解油的(Chayen, 1997; see also Chayen, 1998)。
蛋白結晶板概念
不能模擬形狀分布,因為模型中的晶體尺寸被簡單的定義為該晶體的體積當量直徑.本提出了一個適用于蛋白質結晶過程的基于晶體形狀結構的群體粒數衡算模型.在該模型中,蛋白質晶體的形狀被定量描述為每個晶面到晶體幾何中心的距離,由此提出了基于蛋白質晶形的多維粒度分布,即形狀分布的概念.以溶菌酶結晶過程為例,對溶菌酶晶體結晶的熱力學和動力學行為進行了分析和研究,應用非線性回歸的方法,確定了四方系溶菌酶的結晶動力學方程參數.結合本提出的基于晶體形狀結構的群體粒數衡算模型,質量衡算方程。
蛋白質晶體板制作
設計并制作了一種在微腔中對蛋白質進行微批量法(microbatch)結晶的碟式微流控結晶芯片,它是一種高通量、低成本、低耗樣量(納升級)、操作簡便的蛋白質結晶篩選方法,這種芯片能成功地結晶溶菌酶(lysozyme)和青色熒光蛋白(CyPet).為了系統地比較這種微流控芯片與傳統的使用蒸汽擴散法的24孔結晶板的結晶能力,用3個Hampton結晶試劑盒,在4℃及20℃培養條件下分別對5種標準蛋白(溶菌酶(lysozyme)、木聚糖酶(xylanase)、脂肪酶B(lipase B)、葡萄糖異構酶(glucose isomerase)和嗜熱菌蛋白酶(thermolysin))進行了結晶篩選實驗.結果表明,在4℃時微流控芯片與24孔結晶板有相近數目的結晶條件(91 vs 98)。
蛋白結晶板技術
提出來的一項新型的分析技術,是當前分析科學活躍的發展領域之一,代表了新世紀分析儀器的發展方向。微流控芯片的發展有賴于不斷出現的微機電加工技術,微流控芯片的結構越來越復雜,功能也越來越多樣化,由此,研究和探索簡便的加工技術成為微流控技術發展的一個重要組成部分,本的研究工作將圍繞著微流控蛋白質結晶芯片不同材料的性能與功能要求來進行相關加工技術的探討。 蛋白質結晶微流控芯片是一種用于蛋白質結品條件高通量、快速篩選的新設備,對于結構生物學的發展具有重要意義,是目前研究的熱點。本根據蛋白質結晶系統的要求,設計了具有雙層結構的微流控芯片。
