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分光光度計的工作原理

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分光光度計采用一個可以產生多個波長的光源，通過系列分光裝置，從而產生特定波長的光源，光線透過測試的樣品后，部分光線被吸收，計算樣品的吸光值，從而轉化成樣品的濃度。樣品的吸光值與樣品的濃度成正比。

單色光輻射穿過被測物質溶液時，被該物質吸收的量與該物質的濃度和液層的厚度（光路長度）成正比，其關系如下式：

A=-lg(I/I0)=-lgT=kLc

式中 :A 為吸光度；

I0為入射的單色光強度；

I 為透射的單色光強度；

T 為物質的透射率；

k 為摩爾吸收系數；

L 為被分析物質的光程，即比色皿的邊長；

c 為物質的濃度；

1)1900型等分光光度計，由于其光電接收裝置為光電倍增管，它本身的特點是放大倍數大，因而可以用于檢測微弱光電信號，而不能用來檢測強光。否則容易產生信號漂移，靈敏度下降。針對其上述特點，在維修、使用此類儀器時應注意不讓光電倍增管長時間暴露于光下，因此在預熱時，應打開比色皿蓋或使用擋光桿，避免長時間照射使其性能漂移而導致工作不穩。

2)放大器靈敏度換擋后，必須重新調零。

3)比色杯的配套性問題。比色杯必須配套使用，否則將使測試結果失去意義。在進行每次測試前均應進行比較。具體方法如下;分別向被測的兩只杯子里注入同樣的溶液，把儀器置于某一波長處，石英比色杯;220nm、700nm裝蒸餾水，玻璃比色杯：700nm處裝蒸餾水，將某一個池的透射比值調至100%，測量其他各池的透射比值，記錄其示值之差及通光方向，如透射比之差在±0.5%的范圍內則可以配套使用，若超出此范圍應考慮其對測試結果的影響。

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分光光度計的應用范圍

超微量紫外可見分光光度計是一類很重要的分析儀器，無論在物理學、化學、生物學、醫學、材料學、環境科學等科學研究領域，還是在化工、環境檢測、冶金等現代生產與管理部門，超微量紫外可見分光光度計都有廣泛而重要的應用。超微量紫外可見分光光度計就是利用分光光度法對物質進行定量定性分析，常用于核酸，蛋白定量及細胞培養檢測；超微量紫外可見分光光度計已經是現代分子生物實驗室常規儀器。

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