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制備液相知多少

色譜分析的目的

分析色譜的目的，是分析出混合物中一個（或者幾個）純物質的含量；制備色譜的目的，是從混合物中得到純物質。為了加快分離的時間與提高分離的效率，制備色譜的的進樣品量很大，導致制備色譜柱子的分離負荷的相應加大，也就必須加大色譜柱填料，增大制備色譜的直徑和長度，使用的相對多的流動相。然而，當色譜柱上樣品負載加大的時候，往往導致柱效急劇下降而得不到純的產品。制備色譜，要解決容量與柱子效果之間的矛盾，對重現性也要考慮。從經濟上來說。制備色譜要爭取少用填料，少用溶劑，要盡可能多的得到產品。

液相色譜理論

發展簡況液相色譜法開始階段是用大直徑的玻璃管柱在室溫和常壓下用液位差輸送流動相，稱為經典液相色譜法，此方法柱效低、時間長（常有幾個小時）。高效液相色譜法(High performance Liquid Chromatography，HPLC)是在經典液相色譜法的基礎上，于60年代后期引入了氣相色譜理論而迅速發展起來的。它與經典液相色譜法的區別是填料顆粒小而均勻，小顆粒具有高柱效，但會引起高阻力，需用高壓輸送流動相，故又稱高壓液相色譜法(High Pressure Liquid Chromatography，HPLC)。又因分析速度快而稱為高速液相色譜法(High Speed Liquid Chromatography，HSLP)。也稱現代液相色譜。

制備型液相色譜簡介

色譜是根據混合物中各組分的化學特性對其進行分離的一種分離方法。制備型(Prep)色譜或純化色譜則是指利用色譜方法分離出一定量達到足夠純度的化合物用于后續實驗或處理的色譜方法。科學家首先要確定目標化合物，然后開發色譜方法，將目標化合物從原料、副反應或其它雜質中成功分離出來。其總體目標是滿足日益增長的高通量和高的效率需求，同時運用各種純化技術達到相應的規模、純度和重現性要求。

從大型制藥企業到小規模天然產物研究團隊，純化色譜在眾多科研機構中應用非常廣泛。盡管應用領域各不相同，用戶的一般要求卻非常相似，他們都希望分離出的終產物純度能達到95％或更高。

液相色譜的注意事項

特別提示

1).流動相均需色譜純度，水用20M的去離子水。脫氣后的流動相要小心振動盡量不引起氣泡。2).柱子是非常脆弱的，首先做的方法，先不要讓液體過柱子。

3).所有過柱子的液體均需嚴格的過濾。

4).壓力不能太大，盡量不要超過150kgf/cm2.

5).因為緩沖試劑遇有機的溶劑，會結晶，有損色譜柱，所以，每次由有機相變流動相或流動相變有機相均需用蒸餾水清洗。