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水稻白葉枯病、防治水稻條斑病的生物

應用：本品是防治水稻白葉枯病、防治水稻條斑病的生物。作用機理: 解淀粉芽孢桿菌Lx -11基因組中存在表面活性素、桿菌抗D、泛革素代謝合成操縱子序列，該菌株能代謝產生surfactin、bacillomycin D和fengycin等3類脂肽類。誘導植株3個防衛反應基因PR-1a、PR-1b、PAL和1個轉導基因NPR1的超量表達，并在處理24 h后達到值，顯著降低條斑病菌對水稻植株的侵染。室內生物活性測定: 對水稻白葉枯病菌的EC50為9.96×105 cfu/mL；田間推薦使用濃度（6×107 cfu/mL）是其EC50的60.2倍。對條斑病菌的EC50為1.85×106 cfu/mL；解淀粉芽孢桿菌能產生一種對真菌、病毒等具有抑制作用的物質——脂膚。田間推薦使用濃度（6×107 cfu/mL）是其EC50的32.43倍。經室內活性試驗和田間試驗表明，防治水稻白葉枯病，在水稻白葉枯病發病初期，用本品500～650 mL/667 m2，兌水50～60 kg/667 m2噴霧用藥，7～10 d可再用藥1次。防治水稻條斑病，在條斑病發病初期，用本品500～650 mL/667m2，兌水50～60 kg/667 m2噴霧用藥，7～10 d可再用藥1次。共施藥2次。采用噴霧的方法，噴霧時要均勻。在用藥劑量范圍內對作物安全，未見藥害發生。對捕食天敵、寄生天敵低毒或無影響。

全基因組脫氧核糖核酸(deoxyribonucleicacid,DNA)的提

菌株的鑒定：對篩選得到的乳酸菌進行16S rDNA序列分析，確定其種屬。將活化好的菌液，進行菌株的全基因組脫氧核糖核酸(deoxyribonucleic acid, DNA)的提取[16]，然后對基因組DNA的16S rDNA區域進行PCR擴增，上游引物27F序列5′-AGAGTTTGATCCTGGCCTCA-3′，下游引物1492R序列：5′-GGTTACCTTGTTACGACTT-3′，擴增片段為1 500 bp。PCR體系50 μL：10×buffer 5 μL；脫氧核糖核苷酸三磷酸(deoxy-ribonucleoside triphosphate, dNTP) 5 μL；上游引物(25 μmol/L)0.5 μL；下游引物(25 μmol/L)0.5 μL；Taq DNA 聚合酶(250 U)0.5 μL；模板DNA 1.5 μL ；ddH2O 37 μL。PCR擴增條件為：95 ℃ 3 min；95 ℃ 10 s；55 ℃ 30 s；72 ℃ 1 min；González-Ortiz等[34]研究了解淀粉芽孢桿菌CECT5940和屎腸球菌CECT4515(添加量均為0。72 ℃ 5 min，2～4反應步驟進行30個循環。擴增產物進行瓊脂糖凝膠電泳檢測其純度及濃度，將達到測序要求的擴增產物送至上海華大基因進行測序，將測序結果在美國國立生物技術信息中心(national center for biotechnology information, NCBI)上BLAST進行比對，并確定其種屬。

解淀粉芽孢桿菌兼具3種功能

隨著人們對動物產品的質量要求越來越高，在動物疾病中應用的危害也日趨明確，發酵技術逐漸成為解決畜禽疫病和飼用問題的有效途徑之一，微生態制劑、肽、飼用酶制劑可以作為的補充、替代物，而解淀粉芽孢桿菌兼具此3種功能，所以備受廣大研究者的重視。雖然目前對其應用尚處于初始階段，但已有研究者將新的技術應用于提高其活性物質的產生，為其在動物生產領域的應用奠定了更堅實的基礎。其原因主要有：1)部分解淀粉芽孢桿菌防效不穩定，容易受到環境影響。

【解淀粉芽孢桿菌活菌及其代謝產物】

【產品特性】

物理性狀：輕微發酵味棕色粉末

主要成分：解淀粉芽孢桿菌活菌及其代謝產物

【儲存方法】

密封、陰涼、干燥處存放

【用法用量】

1. 發酵有機肥：與枯草芽孢桿菌及其他微生物一起使用，建議添加量為300g~500g/噸；

2. 配制有機肥：用本品1~2kg/畝與農家肥、化肥或適量細土混勻后底施或追施，移栽作物也可穴施可溝施，機械施肥時，將本品與化肥混勻，可隨化肥施入土壤中，或兌水直接噴灑；

3. 苗床上：每標準苗床用本品5g~10g，與苗床土拌勻后播種；

4. 盆栽花卉：每公斤盆土可用本品1~2克。

【注意事項】

1. 不與殺菌劑、、消毒劑類產品同時使用；

2. 置于避光陰涼處保存，避免強光暴曬；

3. 開封后未用完的產品應及時扎口密封。