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制備液相知多少

色譜分析的目的

分析色譜的目的，是分析出混合物中一個(gè)（或者幾個(gè)）純物質(zhì)的含量；制備色譜的目的，是從混合物中得到純物質(zhì)。為了加快分離的時(shí)間與提高分離的效率，制備色譜的的進(jìn)樣品量很大，導(dǎo)致制備色譜柱子的分離負(fù)荷的相應(yīng)加大，也就必須加大色譜柱填料，增大制備色譜的直徑和長(zhǎng)度，使用的相對(duì)多的流動(dòng)相。然而，當(dāng)色譜柱上樣品負(fù)載加大的時(shí)候，往往導(dǎo)致柱效急劇下降而得不到純的產(chǎn)品。制備色譜，要解決容量與柱子效果之間的矛盾，對(duì)重現(xiàn)性也要考慮。從經(jīng)濟(jì)上來說。制備色譜要爭(zhēng)取少用填料，少用溶劑，要盡可能多的得到產(chǎn)品。

液相色譜理論

發(fā)展簡(jiǎn)況液相色譜法開始階段是用大直徑的玻璃管柱在室溫和常壓下用液位差輸送流動(dòng)相，稱為經(jīng)典液相色譜法，此方法柱效低、時(shí)間長(zhǎng)（常有幾個(gè)小時(shí)）。高效液相色譜法(High performance Liquid Chromatography，HPLC)是在經(jīng)典液相色譜法的基礎(chǔ)上，于60年代后期引入了氣相色譜理論而迅速發(fā)展起來的。它與經(jīng)典液相色譜法的區(qū)別是填料顆粒小而均勻，小顆粒具有高柱效，但會(huì)引起高阻力，需用高壓輸送流動(dòng)相，故又稱高壓液相色譜法(High Pressure Liquid Chromatography，HPLC)。又因分析速度快而稱為高速液相色譜法(High Speed Liquid Chromatography，HSLP)。也稱現(xiàn)代液相色譜。

制備型液相色譜簡(jiǎn)介

色譜是根據(jù)混合物中各組分的化學(xué)特性對(duì)其進(jìn)行分離的一種分離方法。制備型(Prep)色譜或純化色譜則是指利用色譜方法分離出一定量達(dá)到足夠純度的化合物用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)或處理的色譜方法。科學(xué)家首先要確定目標(biāo)化合物，然后開發(fā)色譜方法，將目標(biāo)化合物從原料、副反應(yīng)或其它雜質(zhì)中成功分離出來。其總體目標(biāo)是滿足日益增長(zhǎng)的高通量和高的效率需求，同時(shí)運(yùn)用各種純化技術(shù)達(dá)到相應(yīng)的規(guī)模、純度和重現(xiàn)性要求。

從大型制藥企業(yè)到小規(guī)模天然產(chǎn)物研究團(tuán)隊(duì)，純化色譜在眾多科研機(jī)構(gòu)中應(yīng)用非常廣泛。盡管應(yīng)用領(lǐng)域各不相同，用戶的一般要求卻非常相似，他們都希望分離出的終產(chǎn)物純度能達(dá)到95％或更高。

液相色譜的注意事項(xiàng)

特別提示

1).流動(dòng)相均需色譜純度，水用20M的去離子水。脫氣后的流動(dòng)相要小心振動(dòng)盡量不引起氣泡。2).柱子是非常脆弱的，首先做的方法，先不要讓液體過柱子。

3).所有過柱子的液體均需嚴(yán)格的過濾。

4).壓力不能太大，盡量不要超過150kgf/cm2.

5).因?yàn)榫彌_試劑遇有機(jī)的溶劑，會(huì)結(jié)晶，有損色譜柱，所以，每次由有機(jī)相變流動(dòng)相或流動(dòng)相變有機(jī)相均需用蒸餾水清洗。